ABSTRACT Low-temperature storage is one of the most effective techniques to maintain the quality and durability of cut flowers. Both quality maintenance and durability are dependent on plant metabolism factors such as antioxidant system. The objective was to evaluate the effect of low-temperature on precooling and storage after harvest, on the metabolism of calla lily [Zantedeschia aethiopica (L.) K. Spreng] concerning the antioxidant system, levels of hydrogen peroxide (H2O2), and malondialdehyde (MDA). Therefore, different storage temperatures (4 ºC and 21 ºC) were tested as well as the effect of precooling in different periods (0 to 24 hours). It was observed that the activity of catalase (CAT) and superoxide dismutase (SOD) was increased at 4 °C, as well as inflorescence durability in the commercial standard (around 12 days). At 21 °C, the content of H2O2 and MDA was higher and the visual quality reduction in the inflorescence was accelerated. Low-temperature leads to a higher activity of the enzymes of the antioxidant system (CAT and SOD) and increases postharvest longevity for calla lily. Precooling did not influence the visual quality and longevity of calla lily. Long-term exposure periods at low temperatures, with 12 and 24 hours of precooling caused stress, evidenced higher MDA levels and higher CAT activity. SOD activity was related to low temperature and shorter precooling periods resulted in better antioxidant system activity and lower MDA levels.

RESUMO O armazenamento em baixa temperatura é uma das técnicas mais eficazes para manter a qualidade e a durabilidade das flores cortadas. Tanto a manutenção da qualidade quanto a durabilidade são dependentes de fatores do metabolismo da planta como o sistema antioxidante. O objetivo foi avaliar o efeito da baixa temperatura no pré-resfriamento e armazenamento pós-colheita, no metabolismo do copo-de-leite [Zantedeschia aethiopica (L.) K. Spreng] quanto ao sistema antioxidante, níveis de peróxido de hidrogênio (H2O2) e malondialdeído (MDA). Portanto, diferentes temperaturas de armazenamento (4 ºC e 21 ºC) foram testadas assim como o efeito do pré-resfriamento em diferentes períodos (0 a 24 horas). Foi observado que a atividade da catalase (CAT) e da superóxido dismutase (SOD) aumentou no armazenamento à 4 °C, assim como a durabilidade da inflorescência no padrão comercial (aproximadamente 12 dias). À 21 °C, o teor de H2O2 e MDA foi maior e a redução da qualidade visual na inflorescência foi acelerada. A baixa temperatura leva a uma maior atividade das enzimas do sistema antioxidante (CAT e SOD) e aumenta a longevidade pós-colheita do copo-de-leite. O pré-resfriamento não influenciou na qualidade visual e longevidade do copo-de-leite. Períodos de exposição de longa duração a baixas temperaturas, com 12 e 24 horas de pré-resfriamento causaram estresse, evidenciados por maiores níveis de MDA e maior atividade de CAT. A atividade da SOD foi relacionada à baixa temperatura e períodos mais curtos de pré-resfriamento resultaram em melhor atividade do sistema antioxidante e menores níveis de MDA.

ABSTRACT Genipa americana L. is a forest species of high socioeconomic potential. However, predatory extractivism actions threaten its existence, making it necessary to adopt conservationist practices. G. americana seeds show sensitivity to desiccation and cooling, making it unfeasible for conservation by conventional methods. Thus, cryopreservation is an promising alternative for the long-term conservation of species that produce unorthodox seeds, such as the genipap. In this sense, the objective was to cryopreservation of seeds of G. americana and to evaluate the effects of desiccation and freezing on germination and establishment of seedlings. Initially, seeds were dehydrated in silica gel 0, 16, 18, 20, 22 and 24 h, and then were cryopreserved in liquid nitrogen (LN) (-196 °C) during 24 h. After thawing, the viability and germination were analyzed. Dehydrated and non-cryopreserved seeds were also analyzed. The silica gel desiccation caused a reduction in viability and germination of the seeds of G. americana. The initial seed water content was so high (47%) that storage in LN (+LN) without prior dehydration treatment resulted in seed mortality. It was verified that, the dehydration in silica gel for the minimum time 20 h (corresponding to 14% water content) provides greater freezing tolerance, allowing the successful cryopreservation. Silica gel dehydration followed by immersion in LN was shown to be highly efficient for cryopreservation of seeds of G. americana, besides germinatio after thawing, high survival rates (100%) were obtained, with growth and normal establishment of the seedlings after acclimatization.

Resumo Strelitzia ou ave-do-paraíso, é uma importante planta ornamental tropical de difícil propagação devido aos problemas de dormência das sementes e ao reduzido número de mudas obtidas nas divisões das plantas. Com o maior conhecimento de sua estrutura, é possível desenvolver estratégias para melhorar o processo de propagação dessa espécie, uma vez que as informações sobre estes aspectos são limitadas. Assim, o objetivo foi caracterizar sementes e embriões de Strelitzia reginae. A caracterização das sementes foi realizada por meio de análise de imagens em equipamento GroundEye, Raio-X e análises anatômicas e bioquímicas. Adicionalmente, foram obtidas as seguintes características biométricas das sementes: área de 0,33 cm2, diâmetro máximo de 0,736 cm, diâmetro lateral máximo de 0,59 cm, diâmetro mínimo de 0,58 cm e perímetro de 2,47 cm. As sementes de S. reginae podem ser consideradas amiláceas por conterem 15% de amido. Pela análise anatômica do tegumento, observou-se a presença de uma exotesta (ex) e uma camada parenquimática posterior que foi dividida em mesotesta (m) e endotesta (en). A caracterização de sementes e embriões de estrelícia apresentou observações relevantes para a taxonomia e fisiologia desta espécie. As sementes são aleuro-amiláceas e apresentam área média de 0,33 cm2, com diâmetro lateral máximo de 0,59 cm. Como resultado de estudos anatômicos, foi possível identificar o tegumento responsável pela dormência.

Abstract Strelitzia or bird-of-paradise, is an important tropical ornamental plant that is difficult to propagate because of seed dormancy issues and the low number of seedlings obtained from plant divisions. With greater knowledge of its structure, it is possible to develop strategies to improve the propagation process for this species, since information on this subject is currently limited. Thus, the objective was to carry out an anatomical, morphological and biochemical characterization of Strelitzia reginae seeds and embryos. The characterization of the seeds was performed through image analysis using GroundEye equipment, X-rays, and anatomical and biochemical analyses. Additionally, the following biometric characteristics of the seeds were obtained: an area of 0.33 cm2, a maximum diameter of 0.736 cm, a maximum lateral diameter of 0.59 cm, a minimum diameter of 0.58 cm, and a perimeter of 2.47 cm. The seeds of S. reginae can be considered starchy since they contain 15% starch. By integument anatomical analysis, we observed the presence of an exotesta (ex) and a posterior parenchymatic layer that was divided into a mesotest (m) and endotest (en). The characterization of Strelitzia reginae seeds and embryos showed relevant observations for the taxonomy and physiology of this species. The seeds are aleurostarches and present an area of 0.33 cm2 on average, with maximum lateral diameter of 0.59 cm. As result of anatomical studies, it was possible to determine coat responsible for integument dormancy.

RESUMO As espécies tropicais podem exigir temperaturas mais altas e maiores concentração de reguladores de crescimento para o desenvolvimento in vitro. Em função dessas condições afetarem o metabolismo vegetal, o objetivo foi identificar como diferentes temperaturas na sala de crescimento e concentrações de giberelinas podem afetar os embriões no desenvolvimento in vitro de estrelícia, analisando o efeito sobre EROS e a estabilidade citogenética. Os embriões zigóticos foram cultivados em meio MS suplementado com 0, 5, 10 e 20 µM de GA3 e mantidos em sala de crescimento sob temperaturas de 25 °C, 30/25 °C e 30 °C. Após 60 dias, observou-se maior germinação dos embriões (72%) e comprimento das brotações (3,14 cm) em meio adicionado com 20 µM de GA3. Nessa concentração, houve um aumento na atividade da redutase do nitrato sem alterar a estabilidade citogenética. A temperatura influenciou apenas o comprimento da parte aérea e da raiz, que foram maiores a 25 °C. A 30 °C, a atividade de SOD e APX aumentou em comparação com o tratamento a 25 °C. Assim, a adição de 20 µM de GA3 ao meio de cultura e temperatura de 25 °C na sala de crescimento deve ser utilizada para cultura de embriões zigóticos de estrelitzia.

ABSTRACT Tropical species may require higher temperatures as well as higher growth regulator concentrations for in vitro development. Since these conditions may affect plant metabolism, the objective of this study was to identify how different temperatures and gibberellin concentrations may affect the in vitro development of strelitzia embryos, analyzing the effect on ROS and cytogenetic stability. Zygotic embryos were cultivated on MS medium supplemented with 5, 10 and 20 µM GA3 under temperatures of 25 °C, 30/25 °C and 30 °C. After 60 days, higher embryonic germination rate (72%) and shoot length of plantlets (3.14 cm) were observed on medium containing 20 µM gibberellic acid (GA3). At this concentration, there was an increase in nitrate reductase activity with no change in the cytogenetic stability. The temperature influenced only shoot and root lengths, which were highest at 25 °C. At 30 °C, superoxide dismutase (SOD) and ascorbate peroxidase (APX) activities increased compared with those at 25 °C. Thus, the addition of 20 µM GA3 to the culture medium and a temperature of 25 °C in the growth room should be used for zygotic embryo culture of strelitzia.

Resumo A classificação precisa da qualidade é um dos requisitos do mercado de flores, que está se tornando cada vez mais sofisticado e exigente. No entanto, há uma falta de informações sobre como essa classificação é realizada, e muitas vezes é conduzida de maneira menos empírica e mais subjetiva. Portanto, este trabalho teve como objetivo comparar a eficiência da classificação pessoal (in-person) e usando imagens digitais para determinar a qualidade de flores de antúrio ‘Tropical’. Foram realizados três experimentos quanto ao registro das imagens e ao modo de exibição das imagens e comparando três métodos de classificação da qualidade pós-colheita do antúrio. Concluiu-se que as medidas dos parâmetros colorimétricos podem ser realizadas em qualquer lugar da espata, mas o período em que os parâmetros medidos são afetados pela senescência. Os avaliadores diferem na precisão com que atribuem notas e não há necessidade de conhecimento prévio para avaliar a qualidade usando imagens. O parâmetro L* medido pelo colorímetro apresentou maior correlação com a avaliação da qualidade pós-colheita de Anthurium andraeanum Lind. ‘Tropical’. A classificação por imagens pode ser realizada usando diferentes dispositivos eletrônicos, e a classificação in-person é mais rigorosa do que a classificação realizada com imagens digitais.

Abstract Accurate quality classification is one of the requirements of the flower market, which is becoming increasing more sophisticated and demanding. However, there is a lack of information regarding how such classification is performed, and it is often conducted in a less empirical and more subjective way. Therefore, this work aimed to compare the efficiency of personal classification (in-person) and using digital images to determine the quality of anthurium cv. Tropical (Anthurium andraeanum Lind.). Three experiments were performed regarding the recording of the images and the display mode of the images and comparing three methods of classifying postharvest quality of anthurium. It was concluded that measurements of colorimetric parameters can be performed anywhere on the spathe, but the period in which the parameters are measured does affect. Evaluators differ in the thoroughness with which they assign grades, and there is no need for prior knowledge to assess quality using images. The L* parameter measured by the colorimeter presented higher correlation with the evaluation of postharvest quality of Anthurium andraeanum Lind. ‘Tropical’. Classification by images can be performed using different electronic devices, and in-person classification is more rigorous than classification conducted using digital images.

RESUMO A Campomanesia rufa é uma espécie frutífera nativa do Brasil considerada como vunerável pela IUCN (International Union for Conservation of Nature) e poucas informações sobre a propagação são encontradas. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi desenvolver protocolos de germinação in vitro, micropropagação e calogênese para a espécie. Para germinação in vitro, as sementes foram inoculadas em meio MS suplementado com GA3 (Ácido Giberelico), para a indução da parte aérea, o meio de cultura foi suplementado com BA (benzilamina), BAP (6-Benzilamina Purina) ou TDZ (Thidiazuron). Para o crescimento da parte aérea, o meio de cultura contendo BA, BAP e TDZ foi mantido sob lâmpadas fluorescentes brancas e sob diodos emissores de luz (LED). O GA3 também foi testado para elongação de brotações in vitro. Para o controle da oxidação, o meio foi suplementado com PVP (polivinilpirrolidona) e para a indução de calos, 2,4-D (Ácido 2,4-diclorofenoxiacético) . Os resultados mostraram 68% de germinação, independentemente da concentração de GA3. No estágio de propagação, BAP a 4,5 µM induziu maior número de brotações (4,53) e lâmpadas de LED como fonte de luz combinada com o meio de cultura com 1 μM de BAP induziu maior número de brotações (4,08). A maior média de comprimento de C. rufa (31,9 mm) foi obtida usando 8,8 µM de GA3. O uso de PVP (584,3 µM) controla até 27,3% de oxidação em explantes de folhas jovens. O uso de 10 µM de 2,4-D leva a uma maior formação de calos (58,7%). Portanto, pode-se concluir que o uso de BAP é eficiente na indução de brotações, o PVP controla a oxidação de segmentos foliares e o 2,4-D induz calos em C. rufa.

ABSTRACT The Campomanesia rufa is a fruitful species native from Brazil considered as endangered by the IUC (International Union for Conservation of Nature) and low information regarding its propagation is available. In this context, the aim of the present study was to develop in vitro germination, micropropagation and callogenesis protocols for the species. For in vitro germination, seeds were inoculated in MS medium supplemented with GA3 (gibberellic acid) and for shoot induction, the medium was supplemented with three different cytokinins BA (benzyladenine), BAP (6-Benzylaminopurine) or TDZ (Thidiazuron). For shoot growth, culture medium containing BA, BAP, TDZ were maintained under white fluorescent lamps and blue:red light-emitting diodes (LED). GA3 was also tested on in vitro shoot elongation. For oxidation control, the medium was supplemented with PVP (polyvinylpyrrolidone) and for callus induction, 2.4-D (dichlorophenoxyacetic acid). The results showed 68% germination regardless of GA3 concentration. In the propagation stage, BAP at 4.5 µM induced a higher number of shoots (4.53) and LED lamps as the light source combined with the culture medium with 1 μM BAP induced a higher number of shoots (4.08). The highest average of C. rufa length (31.9 mm) was obtained using 8.8 µM GA3. The use of PVP (584.3 uM) controls up to 27.3% oxidation in young leaf explants. The use of 10 µM 2.4-D leads to a higher callus formation (58.7 %). Therefore, it can be concluded that the use of BAP is efficient in the induction of shoots, PVP controls oxidation leaf segments, and 2.4-D induces callus in C. rufa.

ABSTRACT The market of flowers and ornamental plants is dependent on the diversification of species and the availability of high quality propagation materials. Actually, in vitro culture techniques performance a prominent role in the multiplication and maintenance of commercially propagated ornamental plant species, and are promising for the production of thousands of high quality plants in relatively short term. In addition, when market demand for a particular species is low or zero in a specific period of the year, in vitro culture techniques allow the conservation of cultures under aseptic conditions, by Slow Growth Storage (SGS), from a few weeks to one year (or more), without affecting their viability and potential regrowth. This can be achieved by modifying the constitution of the culture medium and the maintenance conditions of in vitro cultures. Obviously, the success of the technique depends on greatly on the physiological characteristics of the species to be conserved, as well. Once a SGS protocol is optimized, the expenses labor, the possibility of contamination and the probability of somaclonal variation can be reduced markedly.

RESUMO A conservação dos recursos genéticos vegetais é uma medida importante para prevenção do processo de erosão genética. Bancos de sementes são as formas mais comuns de conservação ex situ, entretanto, sementes de cafeeiro não podem ser armazenadas por métodos convencionais. A criopreservação é uma alternativa viável para conservação em longo prazo de espécies, como o cafeeiro, que produzem sementes intermediárias ou recalcitrantes. O objetivo deste trabalho foi criopreservar embriões zigóticos de Coffea arabica L. cv Catuaí Vermelho avaliando o efeito da desidratação antes da criopreservação, e da reidratação osmótica após o descongelamento. Antes da criopreservação foram testados e determinados os teores de umidade em diferentes tempos de desidratação (0, 15, 30, 60 e 120 min). Após a desidratação os embriões foram criopreservados por uma hora em nitrogênio líquido, e após o descongelamento foram reidratados utilizando solução osmótica. Para avaliação da viabilidade de embriões desidratados e/ou criopreservados, utilizou-se o teste com o cloreto de 2,3,5-trifenil tetrazólio. Embriões não desidratados não sobreviveram ao congelamento. Embriões desidratados até cerca de 20% de umidade que não passaram por uma reidratação osmocondicionada, não germinaram. Embriões desidratados até cerca de 20% de umidade, criopreservados e reidratados lentamente após o descongelamento, apresentaram 98% de germinação. A máxima viabilidade obtida através do teste de tetrazólio foi 75% após 60 minutos de desidratação. Portanto, embriões zigóticos de cafeeiro podem ser criopreservados utilizando desidratação física em sílica gel por 60 minutos (23% de teor de umidade), seguida de reidratação com solução osmótica após o descongelamento. Esse método permitiu a germinação de 98% dos embriões criopreservados.

ABSTRACT Conservation of plant genetic resources is important to prevent genetic erosion. Seed banks are the most common method of ex situ conservation; however, coffee seeds can not be stored by conventional methods. Cryopreservation is a viable alternative for long-term conservation of species that produce intermediate or recalcitrant seeds, as coffee. The aim of this work was to cryopreserve Coffea arabica L. cv Catuaí Vermelho IAC 144 zygotic embryos, and analyse the effects of dehydration prior cryopreservation and osmotic rehydration after thawing, in embryos germination and seedlings formation after cryopreservation. Prior to cryopreservation, different dehydration times (0, 15, 30, 60 and 120 min) were tested. Dehydrated embryos were cryopreserved in liquid nitrogen for 1 hour, and after thawing were rehydrated by osmotic solutions. Dehydrated and non-cryopreserved embryos were also analysed. The test with 2,3,5 triphenyl tetrazolium chloride (TTC) was used to evaluate the embryos viability. Non-dehydrated embryos did not survive after freezing. Embryos that were dehydrated until 20% of the moisture content did not germinate when osmotic rehydration was not performed. In contrast, cryopreserved embryos with the same moisture content presented 98% germination when they were rehydrated slowly in osmotic solution. According to tetrazolium tests, embryos presented maximum viability (75%) after dehydration for 60 minutes (23% moisture content). Therefore, coffee zygotic embryos (Coffea arabica L. cv. Catuaí Vermelho) can be successfully cryopreserved using physical dehydration in silica gel for 60 minutes (23% moisture content), followed by osmotic rehydration after thawing. This method allowed a germination of 98% of cryopreserved zygotic embryos.

Byrsonima intermedia A. Juss. é uma planta medicinal e frutífera do Cerrado, cuja propagação convencional é difícil, devido à presença do endocarpo extremamente lignificado. Embora o hipoclorito de sódio (NaOCl) seja amplamente utilizado para a desinfestação superficial, existem poucos relatos de seus efeitos sobre o crescimento do explante. Neste trabalho, o objetivo foi estudar o efeito de diferentes pHs e períodos de exposição de sementes de B. intermedia em uma solução de NaOCl. As sementes foram submetidas a diferentes tempos de exposição (1, 5 e 10 minutos) numa solução de NaOCl com diferentes pHs (5, 7, 10 e 12) e, após o tratamento com hipoclorito de sódio, os embriões foram inoculados em meio WPM com a concentração de 50% de sais sem sacarose, ágar a 0,5% e pH 5,8 e, depois de 75 dias de cultivo, o crescimento das plântulas foi avaliado. A utilização de NaOCl é eficaz na desinfestação de sementes de B. intermedia, independente da variação do pH ou dos períodos de exposição. A porcentagem de plântulas normais, o comprimento da parte aérea e o número de folhas são positivamente afetados pela utilização de solução de NaOCl a pH de 8,5-8,9 ou pelo aumento do período de exposição, enquanto o número de raízes é afetado apenas pelo aumento do período de exposição na solução NaOCl

O objetivo desta pesquisa foi determinar um protocolo de micropropagação para o barbatimão. Para indução de brotações, os segmentos nodais foram inoculados em meio de cultura MS com diferentes concentrações de cinetina (0, 1, 2, 3, 4 e 5mg L-1). Para indução de raízes, brotações obtidas "in vitro" foram inicialmente transferidas para meio MS contendo 50% da concentração de sais e com diferentes concentrações de ANA (0, 1, 2, 3 e 4mg L-1). Posteriormente, as brotações foram transferidas para meio MS contendo 50% da concentração de sais, suplementado com carvão ativado. Para a aclimatização, as plantas obtidas foram transferidas para tubetes contendo diferentes substratos e, então, envolvidas com saco plástico transparente para auxiliar temporariamente na manutenção da umidade. As concentrações de 1 e 5mg L-1 de cinetina foram as mais eficientes na indução de gemas e brotos, respectivamente. Brotações com maiores comprimentos foram observadas em meio de cultura suplementado com 1mg L-1 de cinetina. Raízes em maior número e comprimento foram observados em meio de cultura suplementado com 4mg L-1 de ANA. Os substratos utilizados não afetaram significativamente a taxa de sobrevivência das plantas durante a fase de aclimatização.

The objective of the research was to determine a micropropagation protocol for the specie Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville. For shoot induction, nodal segments were inoculated in MS medium with different concentrations of kinetin (0, 1, 2, 3, 4 e 5mg L-1). For root induction, initially the shoots obtained 'in vitro' were transferred to MS containing 50% of salt concentration and with different concentrations of NAA (0, 1, 2, 3 e 4mg L-1). Lately, the shoots were moved to MS medium containing 50% of salt concentration, supplemented with activated charcoal. For acclimatization, the plants obtained were moved to plastic tubes containing different substrates and then covered with transparent plastic bags in order to maintain the environment humidity. The kinetin concentrations of 5.0 and 1.0mg L-1 were the most efficient for the induction of shots and buds, respectively. Shoot with a higher lengh were observed in MS medium supplemented with 1.0mg L-1 of kinetin. Roots in a higher number and length were observed in MS medium supplemented with 4.0mg L-1 of NAA. The substrates used had no significant effect on the rate of plant survival during the acclimatization stage.

Por apresentar dormência em suas sementes, a propagação do pequizeiro necessita de estudos para a obtenção de mudas por via assexuada. Este trabalho teve como objetivo contribuir para o estabelecimento de um protocolo de micropropagação de pequizeiro. Para indução de brotações, os explantes foram inoculados em meio WPM com diferentes concentrações de BAP e ANA. Para a indução de raízes, brotações obtidas in vitro foram transferidas para meio WPM suplementado com diferentes concentrações de AIB e na presença ou ausência de carvão ativado. As plantas obtidas foram transferidas para sacos de polietileno contendo o substrato, cobertas com uma garrafa tipo pet para auxiliar no processo de aclimatização. O melhor tratamento para a indução de brotações foi aquele que utilizou 0,05mg L-1 de ANA combinado com 0,75mg L-1 de BAP, obtendo-se uma média de 6 brotações por explante, induzindo maior número de gemas por explante (17,4), o que proporcionou a maior taxa de multiplicação (8,7). A utilização de 3mg L-1 de AIB proporcionou a indução de raízes em 100% dos explantes, gerando um número médio de 12,87 raízes por brotação. As raízes desenvolvidas no meio de cultivo contendo carvão ativado foram maiores (33,16 mm), com maior número de raízes secundárias (19,53) e com maior taxa de sobrevivência na fase de aclimatização.

Due the presence of seed dormancy, the propagation of Caryocar brasiliense requires studies in order to obtain young asexually plants. This work had as objective contribute to the establishment of a "pequizeiro" micropropagation protocol. For shoot induction, explants were inoculated in WPM medium with different concentrations and interactions of BAP and NAA. For rooting induction, shoots obtained in vitro were transferred to WPM medium supplemented with different concentrations of IBA in the presence or absence of activated charcoal. The best treatment for shoot induction was the use of 0,05mg L-1 ANA + 0,75mg L-1 BAP, which produced an average of 6 shoots/explant (17,4) providing the highest rate of multiplication (8,7). The use of 3mg L-1 IBA promoted root induction in all explants generating average of 12,87 roots per explant. Roots developed in the presence of activated charcoal presenting higher length (33,16 mm) and higher number of secondary roots (19,53).